荧光分光光度计的使用需要注意哪些事项?

发布时间:

2021-01-26 00:00


  荧光分光光度计是一种利用光的扫描原理来检测样品的仪器,光遇到样品会产生反射、折射等物理现象,再通过专业的强光数据分析,将样品的外观形状以及内部结构构造反映在专家研究的图谱上,从而方便专业人士的研究。那么,此产品是由哪些部分组成的?使用又需要注意哪些事项?
 
  产品的组成:
  1、光源:本仪器常用的光源有高压氙灯、激光器和闪光灯等,高压氙灯作为激发光源时,发出的连续光谱强度较大,是目前应用较多的连续光源,一般高性能的荧光分光光度计会使用激光器作为光源,这种荧光仪可以对单分子进行检测,但是价格比较昂贵,且在使用上也有一定的限制。
  2、单色器:仪器中的单色器是用来分离单色光的,且装有激发单色器和发射单色器两种单色器,激发单色器作用于光源和样品室之间,用来筛选激发光谱,置于样品室和检测器之间的是发射单色器,可以筛选发射光谱。
  3、样品室:样品室一般由石英池架或固体样品架组成,本仪器使用的样品室和紫外可见分光光度计用的具有较大的差异,而且在测量不同类型的样品时光源和样品的测量角度不同。
 
  本产品的使用注意事项:
  1、样品应盛在四面透光的石英比色皿(荧光池)中,如果是挥发性样品应使用带塞的荧光池。
  2、在使用本仪器进行荧光分析时,为了得到稳定可靠的数据,一般需要开机预热氙灯大约30min。如果仪器光源采用的是闪烁氙灯,预热时间可以缩短到10min左右。对某些易感光、易分解的荧光物质,尽量采用长波长、低人射光强度及短时间光照。
  3、温度变化可引起本仪器荧光强度的改变。通常降低温度,有利于提高荧光量子产率,荧光强度增大。温度影响荧光强度的显著程度因样品而异,大部分荧光物质的荧光强度受温度影响不大,测试温度变化不超过±3℃,对测试结果几乎无影响。
  4、当本仪器的荧光物质是弱酸或弱碱时,溶液的pH对荧光强度有较大影响。因为弱酸或弱碱在不同酸度中,分子和离子的电离平衡会发生改变,而荧光物质的荧光强度会因其离解状态发生改变。
  5、荧光分光光度计的荧光物质分子与溶液中其它物质分子之间作用导致荧光强度降低,常见的荧光猝灭剂,如卤素离子、重金属离子、02、硝基化物质、重氮化合物等。溶液中的溶解氧也能引起几乎所有的荧光物质产生不同程度的荧光熄灭现象,因此,在较严格的荧光实验中必须除02。

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